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2025諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)：免疫系統(tǒng)的“和平衛(wèi)士”Treg細(xì)胞
2025年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在免疫學(xué)領(lǐng)域做出奠基性貢獻(xiàn)的科學(xué)家，瑪麗·布倫科（Mary Brunkow）、弗雷德·拉姆斯德?tīng)枺‵red Ramsdell）和坂口志文（Shimon Sakaguchi）。
這一突破性發(fā)現(xiàn)源于免疫學(xué)領(lǐng)域長(zhǎng)期懸而未決的核心謎題：為何擁有強(qiáng)大攻擊力的免疫系統(tǒng)能精準(zhǔn)區(qū)分“敵我"？三位科學(xué)家的研究將答案指向了免疫系統(tǒng)的“衛(wèi)士"——Treg細(xì)胞。
科學(xué)背景與發(fā)現(xiàn)歷程
坂口志文Shimon Sakaguchi的開(kāi)創(chuàng)性發(fā)現(xiàn)：
1995年，當(dāng)大多數(shù)科學(xué)家對(duì)“抑制性T細(xì)胞"的存在持懷疑態(tài)度時(shí)，坂口發(fā)現(xiàn)，這類(lèi)CD4+CD25+的Treg細(xì)胞就像免疫系統(tǒng)的“安全衛(wèi)士"或“剎車(chē)"，能夠抑制其他免疫細(xì)胞的過(guò)度活化，從而防止自身免疫病的發(fā)生。
瑪麗·布倫科（Mary Brunkow）和弗雷德·拉姆斯德?tīng)枺‵red Ramsdell）的基因破譯：
2001年?通過(guò)研究“scurfy"突變小鼠（表現(xiàn)為致命性自身免疫?。?，定位X染色體上的關(guān)鍵基因?FoxP3?，并證實(shí)其人類(lèi)同源基因?FoxP3?突變導(dǎo)致嚴(yán)重的自身免疫性疾病IPEX綜合征。
坂口志文Shimon Sakaguchi理論的匯聚與證實(shí)：
2年后，坂口志文的研究將這兩條線索連接起來(lái)，進(jìn)一步揭示?FoxP3?是Treg細(xì)胞的lineage-defining轉(zhuǎn)錄因子?，其表達(dá)可將普通CD4+ T細(xì)胞轉(zhuǎn)化為具有抑制功能的Treg細(xì)胞。
Treg的核心功能
維持外周免疫耐受?：
通過(guò)細(xì)胞接觸依賴(lài)機(jī)制（如CTLA-4）、分泌抑制性細(xì)胞因子（IL-10、TGF-β、IL-35）及消耗IL-2，抑制自身反應(yīng)性T細(xì)胞的活化和增殖。
防止中央耐受（胸腺內(nèi)陰性選擇）逃逸的T細(xì)胞攻擊自身組織。
動(dòng)態(tài)免疫平衡?：
在感染后調(diào)控免疫反應(yīng)強(qiáng)度，避免過(guò)度炎癥損傷。
在腫瘤微環(huán)境中被“劫持"，抑制抗腫瘤免疫應(yīng)答。
Treg的常用檢測(cè)marker
調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）在誘導(dǎo)和維持免疫耐受中起著至關(guān)重要的作用。
與CD4和CD25一起，轉(zhuǎn)錄因子FoxP3的表達(dá)被認(rèn)為是人類(lèi)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（CD3+CD4+CD25+FoxP3+）的標(biāo)志。理解Treg細(xì)胞的功能離不開(kāi)對(duì)其分子特征的解碼。
Helios（Ikzf2）是Ikaros轉(zhuǎn)錄因子家族的重要成員之一，在60%–70%的Tregs上被檢測(cè)到，并被提議作為區(qū)分天然和外周誘導(dǎo)型Tregs的標(biāo)志物。Helios可以增強(qiáng)FoxP3+Tregs的抑制能力，因?yàn)镠elios通過(guò)與FoxP3啟動(dòng)子結(jié)合來(lái)上調(diào)FoxP3。此外，F(xiàn)oxP3+Helios+Treg的百分比增加已被證明與異基因骨髓移植患者急性移植物抗宿主病的顯著減少相關(guān)。FoxP3+Helios+Tregs不僅與移植物抗宿主病的改善相關(guān)，而且還影響細(xì)菌性肺炎的預(yù)后。
CD39（ENTPD1）可以將三磷酸腺苷（ATP）轉(zhuǎn)化為二磷酸腺苷（ADP），然后轉(zhuǎn)化為單磷酸腺苷（AMP），CD39在人類(lèi)中的表達(dá)僅限于FoxP3調(diào)節(jié)效應(yīng)/記憶樣T（TREM）細(xì)胞的一個(gè)亞群。FoxP3+CD39+Treg主要通過(guò)水解ATP來(lái)消除炎性體介導(dǎo)的促炎反應(yīng)誘導(dǎo)。最近，一些研究表明，多發(fā)性硬化癥，2型糖尿病患者血液中CD39+Treg的數(shù)量顯著減少；CD39+Treg比CD39-Treg更穩(wěn)定和功能更強(qiáng)。此外，觀察到循環(huán)CD39+Tregs的比例增加可抑制人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）和乙型肝炎病毒（HBV）的復(fù)制。
2006年，Hoffmann等人首先定義了一個(gè)Na?ve Treg亞群（CD4+CD25+FoxP3+CD45RA+），與CD45RA+Treg相比，CD45RA-Treg具有強(qiáng)大的免疫抑制作用。最近，一些研究表明，高水平CD45RA-Treg患者的移植排斥率較低。然而，CD45RA-Treg升高可能導(dǎo)致慢性丙型肝炎和HIV感染患者預(yù)后不良。相反，高水平的CD45RA+Tregs與低HIV負(fù)荷和復(fù)制相關(guān)。
如何進(jìn)行Treg的流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)
由于FoxP3及Helios均為核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子，因此實(shí)驗(yàn)需要破核處理才能檢測(cè)到核內(nèi)標(biāo)記，操作比較復(fù)雜，因此Beckman Coulter公司推出了標(biāo)準(zhǔn)化的Treg檢測(cè)試劑方案，可以幫助研究者快速得到準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果。該方案為“Ready to use"預(yù)混的干粉試劑組合，一管一個(gè)測(cè)試，可以常溫運(yùn)輸和存儲(chǔ)，便于標(biāo)準(zhǔn)化操作，極大的降低了樣本的前處理過(guò)程和操作誤差。
流式檢測(cè)方案：
該方案采用了常見(jiàn)調(diào)節(jié)T的Marker如FoxP3，CD25，對(duì)于Treg來(lái)說(shuō)其表達(dá)（CD3+CD4+CD25+FoxP3+），主要起到免疫調(diào)節(jié)，在腫瘤發(fā)生發(fā)展或抑制耐受，習(xí)慣性流產(chǎn)，自免性疾病中發(fā)揮免疫耐受的作用。該方案還可以對(duì)調(diào)節(jié)T的成熟和活化進(jìn)行評(píng)估，采用了CD45RA，對(duì)于初始調(diào)節(jié)T表達(dá)（CD3+CD4+CD25+FoxP3+CD45RA+），對(duì)于成熟及有功能的調(diào)節(jié)T表達(dá)CD39+及Helios。
流式檢測(cè)步驟：
將50μL新鮮全血加入DURAClone IM Treg管1中，高速渦旋6-8秒。將管1孵育15分鐘；
向管中加入3 mL 1XPBS，并以500 x g離心5分鐘；
吸出上清液。輕輕渦旋細(xì)胞沉淀6-8秒。將管1中存在的細(xì)胞沉淀重懸于50μL 100%胎牛血清中；
向試管中加入5μL PerFix nc試劑緩沖液1（固定試劑），渦旋6-8秒，并孵育15分鐘；
向管1中加入400μL PerFix nc Buffer 2（透化試劑），渦旋6-8秒，并將DURAClone IM Treg管1的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移至DURAClone IM Treg管2；
渦流管2持續(xù)6-8秒。孵育60分鐘；
向管2中加入3 mL 1X PBS，并孵育5分鐘；
500 x g離心5分鐘，棄上清，上機(jī)檢測(cè)。
便捷的處理步驟示意圖
流式設(shè)門(mén)策略：
中南大學(xué)湘雅三院的采用該方案的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，Treg及其亞群細(xì)胞確實(shí)在腎移植后肺炎的疾病進(jìn)展中起到一定的作用，總Treg、Helios-Treg、CD39+Treg、CD45RA+Treg的百分比在重度肺炎患者中明顯升高，而Helios+Treg、CD39-Treg、CD45RA-Treg的百分比在重度肺炎患者中明顯降低。并且他們針對(duì)上述的各種Treg亞群的ROC曲線進(jìn)行分析，確定的Cut off值。
結(jié) 語(yǔ)
Treg的發(fā)現(xiàn)革新了免疫調(diào)控認(rèn)知，其應(yīng)用從基礎(chǔ)研究快速邁向臨床，未來(lái)或?qū)⒊蔀榘┌Y、自身免疫病及移植領(lǐng)域的免疫監(jiān)測(cè)中發(fā)揮重要的作用。
參考文獻(xiàn)（上下滑動(dòng)閱覽）
1.諾貝爾獎(jiǎng)/prizes/medicine/2025
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